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基础信息Product information
产品名称:

GIBCO.双抗100ml15140-122

产品型号:

厂商性质:生产厂家

所在地:上海市

更新时间:2019-04-28

产品简介:

GIBCO.双抗100ml 本血清选用放牧于无工业污染及农药污染天然草场的动物资源,以采自出生8小时内未进食的健康新生牛血液为原料,在无菌环境中采血、分离,经过0.1um孔径滤膜过滤,在全封闭百级车间灌装而成。确保无菌、无支原体,无病毒,是高标准、高活性细胞培养用血清,各项质量指标均符合《中国生物制品主要原辅材料质控标准》的要求。经多种原代及传代细胞严格检测,具的促细胞生长效果和稳定性。

产品特性Product characteristics
品牌其他品牌供货周期两周

GIBCO.双抗100ml 15140-122抗体定义:
1:能与相应抗原(表位)特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
2:在人和动物体内,由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合,形成抗原-抗体复合体。 
3:机体内B细胞在抗原刺激下所产生的具特异性免疫功能的球蛋白。 
4:具有抗原结合部位,能与抗原分子上相应表位发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 

 


抗体简介:
抗体(antibody)指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。

 


抗体的概念:
初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分,故曾把抗体统称为丙种(γ)球蛋白。后来发现,抗体并不都在γ区;并且位于γ区的球蛋白,也不一定都具有抗体活性。
1964年,世界卫生组织举行专门会议,将具有抗体活性以及与抗体相关的球蛋白统称为免疫球蛋白(Ig),如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清中存在的异常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亚单位等。因而免疫球蛋白是结构化学的概念,而抗体是生物学功能的概念。可以说,几乎所有抗体都是免疫球蛋白(极少数抗体为RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗体。


抗体分类:
多克隆抗体
单克隆抗体

 

多克隆抗体的制备:
(1)抗原制备
(2)动物免疫
(3)血清采集与检测
(4)多抗纯化与保存


单克隆抗体的制备概述:
  B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。


单克隆抗体的制备过程:
1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。
3)细胞融合的关键: 1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2融合试验大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。
4)阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作*次检测,过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法较简便,RIA法准确。阳性克隆的筛选应进行多次,均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。
5)克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。
动物免疫
细胞融合
克隆筛选
交杂瘤细胞的克隆化
腹水制备与单抗纯化

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