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2025-10-28
一、污染类型识别细菌污染显微镜下可见球形或杆状微生物，培养液迅速浑浊并散发异味，细胞生长停滞。真菌污染培养液保持清亮，但可见丝状或珊瑚状菌丝，细胞状态逐渐恶化。支原体感染细胞生长缓慢，出现小黑点或空泡化，但培养液无明显浑浊。黑胶虫污染显微镜下可见点状游动小体，对细胞生长影响较小，但可能干扰观察。二、清除技术方案（一）细菌与真菌污染处理抗生素处理在培养基中添加庆大霉素（50-100μg/mL）或两性霉素B（2.5μg/mL），连续处理3-5天。需注意长期使用可能影响细胞代谢。物...2025-10-23
一、血清的组成与特性血清是血液凝固后分离出的淡黄色液体，其成分复杂且具有动态变化性。主要成分包括：蛋白质类：白蛋白（维持渗透压）、球蛋白（免疫防御）、纤维蛋白原（凝血功能）及纤维粘连素（促进细胞贴附）。生长因子与激素：成纤维细胞生长因子、神经细胞生长因子、胰岛素等，含量虽少但调控细胞增殖与代谢。微量元素与营养物质：铁离子（由转铁蛋白携带）、氨基酸、葡萄糖及脂质，支持细胞基础代谢。其他成分：多胺类、无机物（如钙离子）及未知因子，其功能仍在研究中。血清成分受供体动物年龄、性别及营...2025-10-16
一、抗原修复不充分原因：甲醛固定导致抗原表位交联封闭，或修复液pH值错误、时间不足。解决：使用pH6.0柠檬酸盐缓冲液（多数抗体适用）。高压修复（121℃,2~3分钟）优于微波修复。二、一抗问题原因：浓度过低、孵育时间过短或抗体失效。解决：进行浓度梯度测试（如1:50~1:400）。设立阳性对照验证抗体活性。三、组织固定不当原因：固定时间过长（48小时）或固定液浓度过高。解决：推荐10%中性福尔马林固定6~24小时。及时固定（大标本需切开）。四、操作失误原因：组织干燥、切片过...2025-09-16
一、抗体使用规范与保存策略1.接收与预处理离心操作：4℃条件下12,000rpm离心3分钟（体积分装原则：按单次使用量分装（≥10μl/份），避免反复冻融导致的活性损失特殊类型处理：腹水抗体需立即冻存（含蛋白酶易降解）荧光标记抗体需全程避光操作2.保存条件优化长期保存：-20℃（普通抗体）或-80℃（珍贵抗体），添加50%甘油可降低冻融损伤短期保存：4℃不超过2周，置于冰箱内层远离除霜区防腐措施：0.02%叠氮钠可抑制微生物生长（活细胞实验禁用）二、重组蛋白使用规范与保存策略...2025-09-12
一、定义细胞裂解（CellLysis）是生物化学和分子生物学研究中的基础技术，指通过物理、化学或生物方法破坏细胞膜/壁结构，释放胞内成分的过程。二、裂解机制与原理1.细胞结构特征不同生物细胞具有特异性结构：原核细胞：肽聚糖细胞壁（革兰氏阳性菌含磷壁酸）真核细胞：磷脂双分子层膜结构（动物细胞）或纤维素细胞壁（植物细胞）2.裂解作用机制三、标准操作流程1.哺乳动物细胞裂解细胞收集：胰酶消化后离心（300×g,5min,4℃）裂解缓冲液：RIPA缓冲液（50mMTris-HClpH...2025-09-04
在生物实验中，标准溶液的准确性直接影响实验结果的可靠性。然而，配置过程中常因操作细节疏忽导致误差。本文结合生物实验特点，梳理标准溶液配置的常见问题及规范操作，帮助实验人员规避错误。一、生物实验标准溶液的特殊要求溶质选择生物实验常用标准品（如蛋白质、核酸）需低温保存，配置前需室温平衡，避免冷凝水影响称量精度。酶类标准品需避免反复冻融，建议分装后使用。溶剂与器皿核酸溶液需使用无RNase/DNase的枪头、离心管，器皿需高温灭菌或DEPC处理。蛋白质溶液需避免使用强酸/强碱容器，...