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基础信息Product information
产品名称:

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

产品型号:D-10110

厂商性质:生产厂家

所在地:上海市

更新时间:2020-07-17

产品简介:

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

产品特性Product characteristics
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工

【产品文献支持】
 影响因子(IF)=3.78:Rapeseed protein-derived ACE inhibitory peptides LY, RALP and GHS show antioxidant and anti-inflammatory effects on spontaneously hypertensive rats南京财经大学《Journal of Functional Foods》

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒​资料:
规    格 (48T/96T)
样品类型  血清、血浆、细胞培养上清等样品类型
检测方法  酶联免疫法
特 异 性  公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性
交叉反应  由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限,现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此,交叉反应可能仍然存在
样 本 量  50-100 μL
实验时间  1–4.5h
储存条件  2-8°C
储存方法  可以存储在2 - 8°C长达1个月(专家建议:4°C恒温保存,酶免试剂盒实验效果更佳)。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋,避免潮湿
有 效 期  6 months
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒​的原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
elisa试剂盒使用注意事项:
1、Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6、本试剂不同批号组分不得混用。
7、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、底物请避光保存。
双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,操作步骤如下:
(1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
(2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
(3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
(4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。
在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。
假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。
双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响,已被列为这类试剂的一项考核指标。
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
样品要求
客户需提供待检测抗体和包被用抗原。
检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。
样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。
样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建 议若客户样本量充足提供500ul以上。
客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与沟通确认。

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