生长因子,人表皮生长因子受体2（Her2）ELISA试剂盒说明书

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厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2016-01-04

产品简介：

Elisa试剂盒简单介绍：

【产品名称】：人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒

【英文名称】：Human epidermal growth factor receptor 2,HER2 ELISA KIT

【检测种属】：人、大鼠、小鼠等动植物。

【产品用途】：被测样品定性或定量分析

【产品规格】：48T、96T

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】：2-8℃

【供 货 期】：1-3天(现货供应)

【产品性状】：液体盒装

【服务优势】：全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测

【样本储存】：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒操作步骤

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；每孔再加入酶标工作液100μL；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

6、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。

7、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。

8、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。

9、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒的基本原理有这几条： 

  1.抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水 性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；  

  2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学 和酶学活性； 

  3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反 应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。 

安全性

① 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

② 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

③ 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒实验中封闭

  1.ELISA实验中，蔗糖本身没有封闭作用;

  2.封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

  3.加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保护剂”的作用。

  4.蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加，当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理。

ELISA试剂盒的操作技术有哪些影响？

  1.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

  2.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

  3.严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

  4.加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

  5.封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

为何选择上海沪鼎生物科技有限公司人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒？ 

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