补体片断5a试剂盒 ,人补体片断5a（C5a）ELISA试剂盒

产品型号：C5a

厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2016-02-23

产品简介：

一、人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒的实验原理

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

产品名称：人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 

产品规格：96T 48T

产品品牌：沪鼎生物 TSZ

样品类型  血清、血浆、细胞培养上清等样品类型 

检测方法  酶联免疫法

特 异 性  公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性 

交叉反应  由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限，现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此，交叉反应可能仍然存在 

样 本 量  50-100 μL 

实验时间  1–4.5h 

储存条件  2-8°C 

储存方法  可以存储在2 - 8°C长达1个月（专家建议：4°C恒温保存，酶免试剂盒实验效果更佳）。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋，避免潮湿 

有 效 期  6 months 

使用优点  ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白，包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

■灵敏，准确和*的性能

■用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证

■在半天内可完成的现成，方便的检测

二、人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法

1.血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3.细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5.保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

三、人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒操作步骤

1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。

2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。

3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。

注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。

4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。

7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。

8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。

9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸*拍干。

10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。

11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。

12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。

注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

四、“人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒”保存：

1.所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

3.试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用。使用后的剩余试剂盒建议在*实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

五、注意事项

1.于2-8℃保存，有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。

2.中终止液具有腐蚀性，要小心使用。

3.未使用完的板条应密封保存。

4.瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。

六、“人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒”的质量保证：
检测用所有试剂全部都为进口试剂，适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本，灵敏度*。我们专业的ELISA技术服务，保证对所售任何产品一概负责到底，每一份实验结果都真实可靠！
A． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
B． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
C． 本试剂不同批号组分不得混用。
D. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

七、保存条件及有效期

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月

本公司对所有售出的产品保证质量，并提供良好的售后服务，有关产品质量的投诉，请在收到货物的32天内以书面形式提出，并向我公司技术人员提供相应的材料，我们会及时派人解决。所有形式的赔偿或退换仅限于产品本身，不涉及其他间接内容。凡购买本公司任意款elisa试剂盒，均可享受免费代测服务，并提供技术指导。

人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒检测中常见问题解析

近几年来，RDElisa试剂盒已经，酶联免疫试剂盒是较普遍常用的药物残留检测方法，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点，但对实验操作条件的要求比较严格。实验条件主要由实验室的操作环境和操作人员的操作熟练程度两方面组成，但ELISA试剂盒对实验室操作环境的要求是几种药物残留检测方法中相对较低的。由于大部分的试验操作步骤都是由实验人员来完成的，人为的误差相对严重一些。因此，我司根据多年的经验，对RD品牌的Elisa试剂盒常见问题所解析，避免新手对它不了解而耽误实验，浪费金钱。以下是一些常见问题，均以我司所供应的品牌试剂盒为例欢迎阅读参考！
问：加入稀释剂是否会将样本进一步稀释？
答：因为稀释剂是加入到所有的孔中，标准和被测样本都被同样稀释，所以样本的浓度可从标准曲线读出，而不需作稀释调整。
问：我是否可将标准曲线的两端延伸？
答：在任何情况下，我们都不支持超出确定范围的实验结果。在我们确定的测试范围，我们保证实验结果的可重复性。
问：为什么不将测试范围延伸到所述的灵敏度？
答：灵敏度是统计中大于零的可测到的zui低值。它是通过本底信号和试验的可变性计算出来的。灵敏度是将20个零复制物的中值加两个标准差从标准曲线换算成分析物的浓度。而zui低标准是我们可以放心的、仍可与标准曲线成直线相关的zui低点，因而是可定量的。
    问：标准曲线为什么要采用4-pl拟合？
    答：沪鼎生物Systems在研发和质控我们绝大多数的QuantikineELISA试剂盒时，采用4-相参数的曲线拟合（又名为4-pl或sigmoidal曲线拟合）。一般来说，它比log-log和直线有更好的曲线拟合。如果数据分析不可用4-pl的话，log-log是下一个的选择。

用于稀释高浓度的结合物以配成工作液。为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上，在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如 1%牛血清白蛋白)，通过竞争以抑制结合物的吸附。一般还加入具有抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂，如吐温20， 0.05%的浓度较为适宜。在间接测定抗体时，血清标本需稀释后进行测定，也可应用这种稀释液。