N端前脑钠素试剂盒 ,人N端前脑钠素（NT-proBNP）ELISA试剂盒

产品型号：NT-proBNP

厂商性质：生产厂家

所在地：上海市

更新时间：2016-02-23

产品简介：

产品名称：人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒?

产品规格：96T 48T

产品品牌：沪鼎生物 TSZ

样品类型  血清、血浆、细胞培养上清等样品类型 

检测方法  酶联免疫法

特 异 性  公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性 

交叉反应  由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限，现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此，交叉反应可能仍然存在 

样 本 量  50-100 μL 

实验时间  1–4.5h 

储存条件  2-8°C 

储存方法  可以存储在2 - 8°C长达1个月（专家建议：4°C恒温保存，酶免试剂盒实验效果更佳）。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋，避免潮湿 

有 效 期  6 months 

使用优点  ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白，包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

■灵敏，准确和*的性能

■用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证

■在半天内可完成的现成，方便的检测

二、人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法

1.血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3.细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5.保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

三、人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒操作步骤

1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。

2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。

3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。

注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。

4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。

7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。

8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。

9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸*拍干。

10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。

11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。

12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。

注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

四、“人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒”保存：

1.所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

3.试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用。使用后的剩余试剂盒建议在*实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

五、“人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒”*优势：

1.严格的质控体系：所有试剂盒从原料到成品经过严格的质控，确保试剂盒质量及稳定性；

2.产品经过不断优化，具有很好的灵敏度； 

3.综合指标特性，研发便捷操作的试剂盒；

4.*分装：专业的，可靠的实验结果，优秀的产品质量，低廉的市场价格，实惠、经济、可靠。

六、注意事项

1.于2-8℃保存，有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。

2.中终止液具有腐蚀性，要小心使用。

3.未使用完的板条应密封保存。

4.瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。

七、订购说明：

1.绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。 

2.部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。 

3.部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日价格为准。 

4.请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、信息、等形式通知我们。

如何降低人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒背景的步骤：

大家都知道Elisa背景太高，会导致试剂盒检测失败，那么背景过高，而您怀疑洗涤不够时，根据我司多年经验。可以尝试增加洗涤次数。这种封锁液便宜、不乱，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。假如浓渡过高，或者未准确稀释，则会导致高背景。常用的蛋白封锁液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。封锁液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜伏的结合位点。ELISA实验的原理好像很简朴，不过乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗涤和封锁。假如您的背景过高，怀疑封锁不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封锁液，或适当延长封锁时间。血清组分的内在多样性可使它有效拦截很多不同类型的分子相互作用。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封锁液，后者可协助洗涤过程中的封锁。解决这个题目的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。好的封锁液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。在实验结束时，我们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于结果的信噪比。
    假如您的ELISA不幸地碰到了高背景，那么也无需太担心，依次查看ELISA系统中的组分，并排除可能存在的题目。记住，非特异的抗体结合会增加背景。不外，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。目前主要有两种类型的封锁液：蛋白和非离子型去污剂。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。假如您一直被背景题目所困扰，那么也许您该花些时间来优化封锁液。