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产品型号:
产品名称:
磷酸酶(phosphatase)酶联免疫分析试剂盒
产品报价:
产品特点:
磷酸酶(phosphatase)酶联免疫分析试剂盒盒用于测定土壤样本中磷酸酶(phosphatase)活性。
  磷酸酶(phosphatase)酶联免疫分析试剂盒的详细资料:

磷酸酶(phosphatase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围: 22 U/L -820 U/L

规格:96T

使用目的:本试剂盒用于测定土壤样本中磷酸酶(phosphatase)活性。 

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中磷酸酶(phosphatase)水平。用纯化的磷酸酶
(phosphatase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 磷酸酶
(phosphatase),再与 HRP 标记的磷酸酶(phosphatase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗
体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在
酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷酸酶(phosphatase)呈正相关。用
酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中磷酸酶(phosphatase)
活性浓度。

试剂盒组成

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1 瓶

7

终止液

6ml×1 瓶

2

酶标试剂

6ml×1 瓶

8

标准品(1600 U/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶标包被板

12 孔×8 条

9

标准品稀释液

1.5ml×1 瓶

4

样品稀释液

6ml×1 瓶

10

说明书

1 份

5

显色剂 A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 张

6

显色剂 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 个

标本要求

1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀  释。

800U/L

5 号标准品

150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

400U/L

4 号标准品

150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

200U/L

3 号标准品

150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

100U/L

2 号标准品

150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

50U/L

1 号标准品

150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

 

 

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

 

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3。

8. 洗涤:操作同 5。

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

操作程序总结:

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标

 

准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。

注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  • 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔*孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期

1. 试剂盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 个月

产品相关关键字: 磷酸酶 phosphatase试剂盒 酶联免疫分析试剂盒 酶联免疫分析 酶联免疫试剂盒说明书
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