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2025-11-19
一、原理与操作流程双抗体夹心法的核心在于利用两种识别抗原不同表位的抗体：1.固相抗体包被：将一种特异性抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）表面，形成固相抗体层。2.抗原结合：加入待测样本后，样本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗体-抗原复合物，洗涤去除未结合物质。3.酶标抗体结合：加入酶标记的第二种抗体，其与抗原的另一表位结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”夹心结构。4.显色检测：加入底物后，酶催化底物产生有色产物，其光密度值与样本中抗原浓度呈正相关。二、技术优势1.高特...2025-11-13
一、操作前准备仪器预热：开机后需预热20-30分钟，确保光源稳定，避免因未预热导致数据漂移。波长校准：定期检查波长准确度，使用滤光片或标准溶液验证，确保测量波长的精确性。比色皿选择：根据测量波长选用玻璃或石英比色皿，可见光区用玻璃皿，紫外光区必须用石英皿。二、样品处理与测量比色皿使用：仅触碰毛面，透光面避免指纹污染，清洁时用镜头纸轻擦。液体装至三分之二高度，避免溢出或气泡干扰。样品放置：空白溶液调零后，再测样品，确保光路对齐。测量顺序从稀到浓，减少误差累积。测量范围：吸光度宜...2025-11-05
ELISA（酶联免疫吸附试验）是生物学和医学研究中常用的检测技术，主要包括直接法、间接法、竞争法和夹心法四种类型。每种方法都有其独特的优缺点，适用于不同的实验需求。以下是它们的详细对比：直接ELISA法原理：将抗原直接固定在微孔板上，加入酶标记的一抗进行检测。优点：操作流程简短，实验步骤少。无需使用二抗，避免了交叉反应的可能性。缺点：灵敏度较低，因为信号放大有限。一抗需要直接标记，成本较高且制备复杂。适用范围：适用于快速检测，但对灵敏度要求不高的实验。间接ELISA法原理：抗...2025-10-28
一、污染类型识别细菌污染显微镜下可见球形或杆状微生物，培养液迅速浑浊并散发异味，细胞生长停滞。真菌污染培养液保持清亮，但可见丝状或珊瑚状菌丝，细胞状态逐渐恶化。支原体感染细胞生长缓慢，出现小黑点或空泡化，但培养液无明显浑浊。黑胶虫污染显微镜下可见点状游动小体，对细胞生长影响较小，但可能干扰观察。二、清除技术方案（一）细菌与真菌污染处理抗生素处理在培养基中添加庆大霉素（50-100μg/mL）或两性霉素B（2.5μg/mL），连续处理3-5天。需注意长期使用可能影响细胞代谢。物...2025-10-23
一、血清的组成与特性血清是血液凝固后分离出的淡黄色液体，其成分复杂且具有动态变化性。主要成分包括：蛋白质类：白蛋白（维持渗透压）、球蛋白（免疫防御）、纤维蛋白原（凝血功能）及纤维粘连素（促进细胞贴附）。生长因子与激素：成纤维细胞生长因子、神经细胞生长因子、胰岛素等，含量虽少但调控细胞增殖与代谢。微量元素与营养物质：铁离子（由转铁蛋白携带）、氨基酸、葡萄糖及脂质，支持细胞基础代谢。其他成分：多胺类、无机物（如钙离子）及未知因子，其功能仍在研究中。血清成分受供体动物年龄、性别及营...2025-10-16
一、抗原修复不充分原因：甲醛固定导致抗原表位交联封闭，或修复液pH值错误、时间不足。解决：使用pH6.0柠檬酸盐缓冲液（多数抗体适用）。高压修复（121℃,2~3分钟）优于微波修复。二、一抗问题原因：浓度过低、孵育时间过短或抗体失效。解决：进行浓度梯度测试（如1:50~1:400）。设立阳性对照验证抗体活性。三、组织固定不当原因：固定时间过长（48小时）或固定液浓度过高。解决：推荐10%中性福尔马林固定6~24小时。及时固定（大标本需切开）。四、操作失误原因：组织干燥、切片过...