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2020-07-08
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种,主要都是由ABI/PE公司生产，而Bioneer自行研制的384并行高通量DNA合成仪，可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。亚磷酰胺三酯法合成DNA段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相邻的核苷酸...2020-07-01
把细胞养好的三个关键要素是：良好的细胞来源，正确的实验操作，以及合适的培养体系。其中“合适的培养体系”就是要创造适合细胞生长的环境，给细胞建立一个满意的“家”。细胞培养基本条件：1.合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。2.优质血清目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。3.无菌...2020-06-10
颗粒性抗原与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应。其中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。在该反应中，因为单位体积抗体量大，做定量实验时，应稀释抗体。1.直接凝集反应玻片凝集法：是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。如将含有痢疾杆菌抗体的血清与待检菌液各一滴，在玻片上混匀，数分种后若出现肉眼可见的凝集块，即阳性反应，证明该菌是痢疾杆菌。此法快速、简便，但不能进行定量测定。试管凝集法：是一种定量试验方法。多...2020-05-21
胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。如何择取胎牛血清的质量：1、内毒素标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分，因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前，国产血清基本都能达到这一要求，很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高，只要求不高于50EU/ml，高出我国标准10倍。可见，内毒素含量偏高不影响质量，除非含...2020-05-19
ELISA试剂盒的保质期一般都是在一年，假设保存妥当的话，不会出现疑问的。但不要重复冻融。当然假设是正常的DAS-ELISA查看试剂盒等，应当放在4℃支配冰箱保存。建议ELISA试剂盒冻结后一次用完。已开封或许运用后，剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，ELISA查看试剂盒开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免湿润。但要留意的是，假设将ELISA试剂盒刚从冰箱里面拿出来就当即运用的话，也许会影响，其直接的效果是对一些弱阳性标本的查看出现假阴性。建议：先从冰箱...2020-05-13
ELISA试剂盒价格加样时的防错小经验(1)用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常容易区分。(2)可以利用液面反光与没有加的孔加以区别(3)在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面产生小气泡，也可以加以区分ELISA试剂盒试验的操作方法:(1)将抗原按一定的梯度倍比稀释后，按照ELISA从上到下(或者从左到右)的顺序包被。(2)将抗体按一定的梯度倍比稀释后按照ELISA从左到右或者从上到下加入。(3)二抗的...2020-04-28
污染向来是在细胞培养中的大问题。预防或治理污染是细胞培养成功的关键因素。我们在细胞培养时，在开始阶段就要十分重视污染问题，否则会前功尽弃，这样不仅浪费时间，也会浪费人力、物力。(一)有哪几类污染？在细胞培养过程中的污染不只是指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。1、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗菌素，也可能因为操作不慎而引起污染。见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假...