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总结Hyclone胎牛血清的相关知识点

日期:2021-10-14浏览:123次

Hyclone胎牛血清使用方法:


  在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Hyclone FBS或者20%的Hyclone胎牛血清,要根据具体细胞选择合适的胎牛血清浓度。


HyClone胎牛血清保存方法:


(1)长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.


(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.


(3)血清解冻:瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。


如何避免HyClone胎牛血清中产生沉淀?


按如下操作可避免沉淀的产生:


(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。


(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。


(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。


(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。


(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。


(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。


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