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ELISA不显色成白板怎么破?

日期:2022-12-21浏览:290次


 

在做ELISA实验中,相信大家或多或少难免会出现一些状况,就在上周五,小编就在贴吧看到有个吧友发帖问在做ELISA实验,到显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。那么今天上海劲马请咱技术人员给大家分析分析

 

原因分析:试剂已过有效期,或不同试剂盒组分混用,检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。

 

对策:不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。                          

 

整板的黄板现象可能是由于错加其他试剂造成,如同时操作两对半试剂时,测HbsAb板用于测HBsAg等;实验前检查试剂的组分及批号,确认所有组分均属于对应的试剂盒。如盛标本的试管四周常有血痂,易脱落,应远离酶标板。

 

elisa试剂盒超过有效期的产品可能会产生很弱的信号;试剂盒没有按规定进行留存,受高温影响;实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期。孵育温度应控制在37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作,保温期内不宜多开门,以免影响保温。花板,一般是由于临床标本的收集、处理和留存方法不当造成,放置时间(自然放置1~2h)及离心转(3000r/min)、离心时间(15min)应引起注意。

 

试剂、样品用前未平衡至室温从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡,20分钟左右。错加、漏加试剂底物、显色剂AB严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象。实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱,待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的,如有怀疑,可复检标本加入叠氮钠作为防腐剂,酶免实验中的标本禁用叠氮钠作为防腐剂,可选用 proclin、硫柳汞等其他防腐剂,阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出


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