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日期:2025-05-19浏览:98次
一、马血清:不只是营养源,更是细胞功能的“调控者"
血清是细胞培养基中不可-或缺的添加物,为细胞提供营养、生长因子、激素及贴壁因子。与胎牛血清相比,马血清(Horse Serum, HS)具有以下特性:
1.成分差异:
生长因子谱不同:马血清中表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子(IGF)含量较高,而胎牛血清富含成纤维细胞生长因子(FGF)。
激素浓度较低:适合对激素敏感的细胞(如某些神经元或干细胞)。
免疫球蛋白含量低:减少免疫反应干扰,适用于疫苗生产或病毒培养。
2.物理特性:
粘度较低:便于细胞悬浮培养及显微操作。
脂蛋白含量适中:减少脂毒性风险,支持长期培养。
二、马血清的核心应用场景
1. 特定细胞类型的“专属营养液"
神经元细胞培养:
马血清中的神经营养因子(如BDNF)和低激素环境,可促进神经元突触生长并维持电生理活性,常用于海马神经元或背根神经节细胞培养。
昆虫细胞培养:
用于杆状病毒表达系统时,马血清能显著提高重组蛋白产量,且不易形成沉淀,优于胎牛血清。
干细胞诱导分化:
在间充质干细胞(MSCs)向成骨或成脂分化时,马血清可提供更稳定的微环境,避免胎牛血清中未知成分的干扰。
2. 病毒培养与疫苗开发
马血清的低抗体水平减少了对病毒的中和作用,常用于流感病毒、狂犬病毒等的扩增,提高病毒滴度。
3. 特殊研究需求
代谢研究:马血清的代谢物谱与胎牛血清差异显著,适用于比较不同血清对细胞代谢的影响。
伦理替代方案:部分研究为规避胎牛血清的伦理争议(如胎儿采集),转而选择马血清。
三、马血清 vs. 胎牛血清:如何科学选择?
参数 | 马血清(HS) | 胎牛血清(FBS) |
生长因子 | EGF、IGF-1丰富 | FGF、PDGF丰富 |
适用细胞类型 | 神经元、昆虫细胞 | 干细胞 常规哺乳动物细胞(如HeLa)
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免疫干扰 | 低 | 较高(含IgG) |
成本 | 低于FBS | 较高 |
四、马血清使用实操指南
热灭活处理:
多数情况下无需热灭活(避免生长因子降解);若需灭活补体,56℃水浴30分钟即可。
浓度优化:
常规细胞培养:添加5%-10%马血清。
神经元分化:可提高至15%-20%。
质量控制:
选择内毒素水平低(<10 EU/mL)的批次;
每批血清需进行细胞增殖测试(如CCK-8法)和无菌验证。
储存条件:
分装后-20℃保存,避免反复冻融;
解冻时置于4℃缓慢融化,减少蛋白聚集。
五、注意事项与常见问题
批次差异:不同来源的马血清成分可能存在波动,建议关键实验前进行多批次测试。
替代方案:对于高敏感性细胞,可尝试无血清培养基或马血清与胎牛血清混合使用。
污染风险:马血清需警惕支原体或病毒污染,建议选择γ-射线辐照处理的商品化产品。