钱经理揭晓沪鼎ELISA试剂盒背后的秘密

    我公司成立至今近乎六年，产品供实验室科研使用，凭高质量、服务完善、价格合理等优势一路至全国。主要客户群包括医院、学校、经销商。昨天下午，一家来自北京的经销商到我公司钱咨询试剂盒系列产品，在钱介绍产品时揭晓上海沪鼎ELISA试剂盒背后的秘密： 
一、可逆性
    抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：Ag+Ab→Ag?Ab。抗体的亲和力是抗原抗体间的固有结合力，可以平衡常数K表示：K=[Ag Ab]/[Ag][Ab]。Ag Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。在抗血清中，特异性的IgG抗体仅占总IgG中的极小部分。用亲和层析法提取的特异性抗体，称为亲和层析纯抗体，应用于免疫测定中可得到更好的效果。

二、zui适比例
    在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例zui合适的范围，称为等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩，则无沉淀物形成，在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带，抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时，应使反应系统中有足够的抗体量，否则测得的量会小于实际含量，甚至出现假阴性。
三、ELISA试剂盒的特异性
    抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。但是这种特异性也不是的。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗体反应中可出现交叉反应。
四、敏感性
    在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍，达ng/ml水平。 
    酶免疫测定可分为均相和非均相两种类型。在均相EIA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。均相EIA在临床检验中较少应用。非均相EIA需先进行游离的和结合的标记物的分离。固相载体可用作一种分离手段，这种固相酶免疫测定方法在1971年zui初建立时称为酶联免疫吸附剂测定简称为ELISA，在国内有译作酶联免疫吸附试验或酶标。
    ELSIA操作指南：固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
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