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2013-04-12
技术指导ELISA试剂盒包被方式将抗原或抗体固定在过程称为包被（coating）。换言之，包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用于。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。IgG对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附力，其联结多发生...2013-04-09
ELISA试剂盒酶标记抗体的制备酶标记抗体的制备方法主要有两种，即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。（1）戊二醛交联法：戊二醛是一种双功能团试剂，它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接加入酶与抗体的混合物中，反应后即得酶标记抗体。ELISA中常用的酶一般都用此法交联。它具有操作简便、有效（结合率达60%-70%）和重复性好等优点。缺点是交联反应是随机的，酶与抗体交联时分子间的比例不严格，结合物的大小也不均...2013-04-01
简述成人胰腺消化、胰岛分离方法：尸体胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存运输。到实验室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰组织，从胰管内插入穿刺针，丝线缝扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨胀后将胰腺切片，置消化罐中并放入数颗玻璃珠，加500μm孔径的不锈钢丝网，旋紧罐盖。开启蠕动泵将剩余的Liberase酶溶液泵入罐内，控制罐内温度37℃，手动振摇消化罐循环消化，于10分钟后开始取样镜检，待大部分胰岛分离后用冷的含10%胎牛血清（FB...2013-03-29
如何选择阳性对照？阳性对照即是100%出现该结果的“实验”组，材料是确定的；阴性对照则是肯定不会出现结果的“实验组”，材料也是确定的；之所以加引号，是因为除了实验需要验证的变量，其他条件全部都是一样的，用来排除其他实验情况对结果产生的影响。例如，验证一转基因玉米是否有抗药性，需要选择同种的转基因成功的抗药玉米做阳性对照，无转基因的做阴性对照，从而保证除了该基因其他条件一致；一个成功的实验，通常情况下必须有阳性对照和阴性对照排除其他干扰情况如果您需要合适的阳性对照，请核查数据表...2013-03-27
干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。实验步骤1.制备诱生剂：采用NDVF系弱毒株，以鸡胚尿囊液...2013-03-25
ELISA双抗体夹心法及间接法的正确操作步骤elisa试剂盒原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法（图a）、用于检测抗原的双抗体夹心法（图b）以及用于检测小分子抗原或...