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2023-12-07

细胞消化不下来?小伙伴们在给贴壁细胞传代的时候有没有遇到细胞消化不下来的情况呢?有时候等了10分钟甚至20分钟细胞仍岿然不动,继续等待怕消化过度,暴力吹下又怕对细胞造成机械损伤,可谓进退两难。小尚为大家总结了细胞难消化的原因,以及对应的处理方式:(本文仅针对胰蛋白酶,若您使用其他类型的细胞解离试剂,可以在评论区留言)1.细胞贴壁紧不同种类的细胞贴壁的松紧程度是不一样的,比如293系列细胞贴壁很松,是晃一晃就可能掉下来的程度。而MCF10A细胞却贴壁很紧,可能需要消化5-10m...

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2023-12-01

糖酵解过程是从葡萄糖开始分解生成丙酮酸的过程,全过程共有10步酶催化反应。1.葡萄糖磷酸化糖酵解第一步反应是由己糖激酶催化葡萄糖的C6被磷酸化,形成6-磷酸葡萄糖。该激酶需要Mg2+离子作为辅助因子,同时消耗一分子ATP,该反应是不可逆反应。2.6-磷酸葡萄糖异构转化为6-磷酸果糖这是一个醛糖-酮糖同分异构化反应,此反应由磷酸己糖异构酶催化醛糖和酮糖的异构转变,需要Mg2+离子参与,该反应可逆。3.6-磷酸果糖磷酸化生成1,6-二磷酸果糖此反应是由磷酸果糖激酶催化6-磷酸果糖...

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2023-11-23

小鼠皮质酮(CORT)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T2μg/L-80μg/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中皮质酮(CORT)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠皮质酮(CORT)水平。用纯化的小鼠皮质酮(CORT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入皮质酮(CORT),再与HRP标记的皮质酮(CORT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过che底洗涤后加底物TMB显色。T...

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2023-11-16

1.2.1抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu)链。重链和轻链的N端的氨基酸排列顺序因各种抗体而异,称为可变区...

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2023-11-10

BCA法是一种常用的蛋白质浓度检测方法,它通过比色反应测定样品中的蛋白质浓度。如果在BCA法制作标准曲线时出现了偏高的情况,可能有以下原因:标准品的配制不准确:在BCA法中,标准品的配制非常关键,如果标准品的浓度不准确,会导致标准曲线的点位偏高或者偏低。反应时间过长:在BCA法中,试剂的反应时间对结果有较大影响。如果反应时间过长,会导致反应过度,使得吸光度值偏高。样品中含有干扰物质:某些样品中可能含有干扰物质,如胆固醇、尿素等,这些物质可能被误判为蛋白质,从而导致测量结果偏高...

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2023-11-02

人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T25pg/ml-480pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定样本表皮生长因子(EGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF),再与HRP标记的表皮生长因子(EGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过CHE底洗涤后加底物TMB显色。T...

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2023-10-27

elisa试剂盒技术在60年代提出,因为具有灵敏度高、特异性强,酶免疫试剂的性质比较稳定,操作方法简便快速、无放射性污染以及应用范围广等很多优点,ELISA试剂盒迅速在医学基础理论研究,临床病毒学和生物化学检验等工作中获得了广泛的应用。但是在使用ELISA试剂盒的时候还是有很多问题需要我们注意一下的!ELISA试剂盒注意问题:1、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。2、底物请避光保存。3、严格按照技术说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。4、所有样品,洗涤液和...

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