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2016-10-25

今日,上海沪鼎要为大家讲解ELISA试剂盒实验中的一些注意事项,以供大家参考:操作过程的控制:(1)严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。(2)加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(...

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2016-10-19

使用胎牛血清应注意什么?今天小编要为大家讲解使用胎牛血清时应注意的小细节,毕竟细节是实验成功与否的关键:1.使用前需做细菌、支原体培养及内毒素测定,在确实无污染的情况下方可使用。2.每批小牛血清测定总蛋白含量并分别配成10%20%,25%于荃础培养墓和HAT培养基中,对骨越瘤细胞和杂交瘤细胞进行培养,观察小牛血清对瘤细胞和融合细胞的细胞毒性。若在20%浓度小牛血清情况下,细胞生长差或死亡,则该批小牛血清不适宜应用。3.应在细胞培养瓶内进行,培养期间随时可放于倒置显微镜下观察,...

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2016-10-13

ELISA标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢?1.粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。2.根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震荡,室温静置溶解10-30min,让粉末*溶解。注意:加水后暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。3.标准品梯度稀释(1)标准品稀释液的选择:若血清、血浆、组织匀浆样本,用试剂盒中的标准品稀释液,梯度稀释标准品。若...

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2016-10-08

今天上午,我公司技术人员与钱讨论近日的问题解决情况,而针对近日咨询较多的elisa性能标准问题,我公司的技术专员表示出对elisa试剂盒的参考标准熟知以下7项就够了:一、标准曲线1.定量方法:标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。2.定性方法:工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定,每个浓度重复不少于5次,浓度与响应值之间应有一定的关系。二、检测限和定量限1.检测限:20份空白样品测定均值加3倍标准差。2.定量限:应...

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2016-09-22

Western实验中,经过SDS-PAGE电泳分离后的蛋白质样品需经过“转膜”步骤,从PAGE胶转移到膜上固定,才能用各种方法进行WesternBlot的检测和显示,而且为了防止没有电场的情况下已经分离的蛋白条带扩散,转膜要尽快进行。转膜是对Westernzui终结果影响zui大的一步,转膜质量的好坏直接决定了实验结果的好坏。下面介绍一些实用技巧,赶紧Get起来吧。1.膜的选择膜的选择主要从实验目的和实验要求来考虑,例如做分子量小于20kDa的小蛋白,0.45um的膜是不可取...

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2016-09-18

近日,英国伦敦大学的研究人员发表在Cell子刊Current-Biology上的一项研究调查了成年大脑通讯中断的驱动机制,尤其是主要负责学习和记忆的海马体内神经细胞间连接的缺失,并发现了隐藏在大脑神经连接缺失背后的关键机制,这些缺失能导致小鼠失忆。一种蛋白质被激活能让小鼠失忆。图片来源:伦敦大学学院神经细胞间连接的破坏是阿尔茨海默氏症等疾病的早期特征,并能引发记忆和思维衰退等令人痛苦的症状,但其背后的生物学机制目前尚不明确。近日,发表在Cell子刊《当代生物学》(Curren...

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2016-09-13

外泌体是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构,内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质,包括肿瘤细胞在内的几乎所有类型的细胞,都可以产生并释放外泌体。外泌体由细胞分泌释放出来,在血液等体液内传播,zui后又可被其他细胞吞噬,是细胞间通讯的重要介质。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,从外泌体研究方向而言,干细胞、免疫、microRNA、靶向给药等都是热门研究领域,2013年诺贝尔生物/医学奖授予三位在细胞囊泡方面贡...

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