人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)ELISA试剂盒 使用手册 产品货号:DB332-Hu 使用前请仔细阅读本手册。如果有任何问题,请联系我们,我们会给你提供专业的技术服务。 【产品名称】 中文名称:人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)ELISA试剂盒 【包装规格】 96T/盒 【预期用途】 仅供科研使用,定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液等相关样本中人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)的浓度。 【检测原理】 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)水平。用纯化的人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1),再与HRP标记的血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1)浓度。 【产品性能】 1、物理性能 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气(如有漏气,不影响使用)。 2、剂量反应曲线线性 标准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.9900。 3、检测范围 15 μg/L -480 μg/L。 4、灵敏度 di检出剂量小于3.75 μg/L。 5、精密度 精密度用样品测定值的变异系数CV 表示。CV(%) = SD/mean×100 批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD 值。 批间差:选取3 个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定10 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD 值。 批内差: CV<6.4% 批间差: CV<7.9% 6、回收率 分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。 Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) | Tissue Lysates (n=5) | 93-110 | 100 | Serum (n=5) | 98-105 | 101 | EDTA plasma (n=5) | 95-109 | 102 | Cell culture media (n=5) | 82-101 | 92 |
7、线性 分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。 Sample | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 | Tissue Lysates (n=5) | 82-109% | 84-95% | 90-102% | 80-93% | Serum (n=5) | 81-103% | 89-99% | 86-98% | 83-101% | EDTA plasma (n=5) | 85-97% | 82-101% | 83-105% | 79-91% | Cell culture media (n=5) | 83-105% | 89-112% | 81-106% | 82-110% |
8、特异性 本试剂盒识别天然和重组人血管内皮细胞粘附分子1 (VCAM-1),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。 9、稳定性 经测定,试剂盒在有效期内务必按推荐温度保存,活性降低率小于5%。为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。 |